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    大型层析柱的特点及简介

    点击次数:1677 发布时间:2017-05-17
    大型层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。层析柱的直径大小不影响分离度,样品用量大,可加大柱的直径,一般制备用凝胶柱,直径大于2厘米,但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外, 直径加大,洗脱液体体积增大,样品稀释度大。分离度取决于柱高,为分离不同组分,凝胶柱床必须有适宜的高度,分离度与柱高的平方根相关。大型层析柱
      以中压柱层析法提取分离冬凌草甲素为例
      中压分离层析柱操纵方法
      以中压柱层析法提取分离冬凌草甲素为例
      1 吸附剂的处理及柱子装填
      将一定量薄层层析硅胶装人搪瓷盘置于烘箱中,取出放置室温即可装柱。柱子采用干法填充,填满整个柱体,不留死体积,密封后用柱塞式计量溶剂泵按丙酮一石油醚比例泵人溶剂,至溶剂流出止。
      2 上样
      3 洗脱
      至洗脱完全,相同流份合并,回收溶剂。将冬凌草甲素流份合并蒸干。加人适量甲醇热溶后自然放置,析出结晶,为冬凌草甲素。
      4 层析柱再生、平衡
      5 重结晶
      冬凌草甲素结晶析出完全后,减压过滤,然后用少量甲醇洗涤(洗涤液保存,作下次热溶冬凌草甲素用)。将冬凌草甲素再用适量甲醇热溶后放置,结晶再次析出,待结晶完全后,抽滤,用少量乙醚洗涤,将结晶室温下晾干后置真空干燥箱中,真空干燥至恒重。密封于瓶中,置干燥器中保存。
      6 薄层层析分析
      表明在该展开系统下,冬凌草甲素样品和对照品都具有相同的RF值,并呈现出同样的蓝绿色斑点,在制备的冬凌草甲素样品中,没有杂质斑痕。大型层析柱
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